ELISA sonucu kötü mü?Doğru Elisa plakasını seçmek için bizi takip edin.
Uygun bir ELISA plakası seçmek, başarılı bir ELISA deneyinin ilk adımıdır, ancak birçok kişi bunu görmezden gelir. İnsanlar deney yaptıklarında, genellikle yalnızca deneyin kendisini düşünürler, ancak ürünün deney üzerinde genellikle büyük bir etkisi olduğunu bilmezler. Doğru ürün seçimi, deneyin başarısına katkıda bulunacaktır. ELISA deneyleri yaparken genellikle aşağıdaki faktörleri göz önünde bulundururuz:
1. Alt şekli
Şu anda, üreticiler enzim etiketli kuyuları bağımsız kolonlar olarak tasarlamakta ve kuyular arasındaki mesafeyi bağımsız olarak ayrılabilmeleri için uygun şekilde artırarak çapraz kontaminasyonu en aza indirmektedir. Farklı tipteki Elisa plakaları, kuyu dibinin farklı şekillerine sahiptir. İşte bazı yaygın delik alt şekilleri:
Düz dipli: Alt kısım yataydır, F alt olarak da adlandırılır. Işık, ışığı en büyük ölçüde iletebilen alt kısımdan sapmayacaktır. Görünürlük veya başka nedenlerle yuvarlak dip gerektiren deneyler için kullanın.
Round Bottom: U-bottom olarak da bilinir, tortuları test etmesi gereken uygulamalar için uygun olan en iyi temizleme sonuçlarını ve hibrit performansı sağlar.
C-taban: Düz tabanın avantajlarını bir araya getirirken, düz taban ile yuvarlak taban arasında iyi bir temizleme etkisi sağlayabilir.
Koni Alt: V-taban olarak da bilinir, küçük hacimlerin optimal geri kazanımı için mikro numunelerin hassas örneklenmesi ve depolanması için uygundur.
2. Elisa tabağının rengi
Elisa plakasının üç rengi vardır: şeffaf, siyah ve beyaz.
ELISA'nın çoğu, deney materyali olarak şeffaf plakaları seçer. Beyaz ve siyah Elisa plakaları genellikle lüminesans tespiti için kullanılır. Siyah ELISA plakasının kendisi ışığı emer, bu nedenle sinyali beyaz ELISA plakasınınkinden daha zayıftır. Black Elisa plakaları genellikle floresan algılama gibi daha güçlü ışığı algılamak için kullanılır; aksine, beyaz Elisa plakaları daha zayıf ışık tespiti için kullanılabilir ve genellikle genel kemilüminesans ve substrat renk gelişimi (çift lusiferaz gibi) için kullanılır. raportör gen analizi).
3. Elisa plakasının malzemesi
Yaygın malzemeler polietilen (PE), polipropilen (PP), polistiren (PS), polivinil klorür (PVC) ve polikarbonattır (PC).
ELSIA'da en yaygın kullanılan malzemeler polistiren ve polivinil klorürdür. Polivinil klorür yumuşak tahta incedir, kesilebilir ve fiyatı düşüktür. Dezavantajı, cilanın polistiren levha kadar iyi olmaması ve deliğin tabanının polistiren kadar düz olmamasıdır. Ancak karşılık gelen arka plan değeri de artacaktır. Genellikle, ELISA plakasının yüzeyinde iyon aşılama işlemi gerçekleştirilir ve substrat yüzeyinin performansını iyileştirmek için aldehit grupları, amino grupları ve epoksi grupları gibi aktif fonksiyonel gruplar polimer yüzeyine eklenir.
4. farklı bağlanma mekanizmaları
Kaplama malzemesinin plakanın alt yüzeyine etkin bir şekilde bağlanması ELISA'da çok önemli bir adımdır. Bu nedenle, uygun bir Elisa plakası seçmek için kaplanacak maddenin yapısal özellikleri ve kimyasal özellikleri deneyden önce dikkatlice analiz edilmelidir. Genel olarak konuşursak, kaplama malzemesini plakanın altına bağlamanın birkaç yolu vardır: pasif adsorpsiyon, kovalent bağlama ve afinite yakalama.
Pasif Adsorpsiyon: Pasif adsorpsiyon mekanizması karmaşıktır ve kaplama malzemesi ile plakanın tabanı arasındaki bağlanma esas olarak moleküller arası kuvvetlere (van der Waals kuvveti) ve hidrojen bağlarına dayanır. Çoğu ELISA'da, kaplama maddesinin plakanın dibine bağlanması pasif adsorpsiyon ile gerçekleştirilir. Genel olarak, orta ve büyük moleküler ağırlıklı antijenler (veya antikorlar) ile plakanın alt kısmı arasındaki bağlanma, pasif adsorpsiyon ile gerçekleştirilir. Bir Elisa plakası seçilirken plakanın alt yüzeyinin hidrofobik/hidrofilik özellikleri genellikle göz önünde bulundurulur. Aşağıdaki tablo, farklı hidrofilik substrat yüzeylerinin uygulama kapsamını ve kullanımını listeler:
hidrofilik | Öncelik bağlama | ana kullanım |
- | Lipitler, lipoproteinler, büyük proteinler gibi önemli hidrofobik bölgeler içeren moleküller | Antijen ELISA, FLA, LIA |
artı | Orta ila büyük proteinler, immünoglobulinler, albümin gibi hidrofilik/hidrofobik özelliklere sahip biyomoleküller | Çift Antikorlu Sandviç ELISA, Antijen ELISA |
artı artı | Küçükten büyüğe proteinler, immünoglobulinler, albümin, LPS, fosforile proteinler, glikoproteinler gibi hidrofilik/hidrofobik özelliklere sahip biyomoleküller | Çift antikor ELISA, FIA, LIA |
artı artı artı | Glikoproteinler, polar lipid molekülleri, fosfolipidler, kardiyolipidler | antijen ELISA |
Afinite Yakalama: Afinite yakalama, etiketli makromoleküllerin karşılık gelen reseptörlerine spesifik bağlanmasına dayanır. Etiketli makromoleküller, kimyasal birleştirme veya genetik mühendisliği ile elde edilebilir.
Affinity Capture'ın özellikleri şunlardır:
1. yüksek özgüllük
2.Ölçüm sonuçlarının sinyal-gürültü oranını iyileştirebilir
Daha yaygın kuyu alt yüzeyleri şunlardır: streptavidin (streptavidin) kaplı yüzey; nikel şelat (Nikel Şelat) kaplı yüzey ve glutatyon (Glutatyon, GSH) kaplı yüzey.
3. Streptavidin yüzeyi: Streptavidin ve biotinin yüksek afinitesi ve özgüllüğü, alt plakanın kaplanmış proteine bağlanmasını gerçekleştirmek için kullanılır.
4. Nikel şelat yüzeyi: Nikel şelat, füzyon proteinlerini His (histidin) etiketleri ile bağlamak için polimer yüzeyine bağlanır.
5. Glutatyon yüzeyi: Alt plakanın kaplama proteinine bağlanmasını sağlamak için glutatyon ve glutatyon sülfidriltransferaz (GST) arasındaki enzim ve substrat özgüllüğünün kullanılması.
Neden BKMAM Elisa plakasını seçmelisiniz?
Yüzde 100 polistiren malzemeden üretilmiştir,
Yapışkan hücre kültürü için uygun,
Reaksiyon direkleri için düz taban, eşit kalınlık ve düzgün boyut,
Bireysel paket ile steril,
Fabrika fiyatı ile yüksek kalite.
